(ফ্লো সাইটোমেট্রি , এফসিএম) হল একটি কোষ বিশ্লেষক যা দাগযুক্ত সেল মার্কারগুলির ফ্লুরোসেন্স তীব্রতা পরিমাপ করে। এটি একটি উচ্চ প্রযুক্তির প্রযুক্তি যা একক কোষের বিশ্লেষণ এবং বাছাইয়ের উপর ভিত্তি করে তৈরি করা হয়েছে। এটি দ্রুত আকার, অভ্যন্তরীণ গঠন, ডিএনএ, আরএনএ, প্রোটিন, অ্যান্টিজেন এবং কোষের অন্যান্য ভৌত বা রাসায়নিক বৈশিষ্ট্যগুলি পরিমাপ এবং শ্রেণীবদ্ধ করতে পারে এবং এই শ্রেণীবিভাগের সংগ্রহের উপর ভিত্তি করে করা যেতে পারে।
ফ্লো সাইটোমিটার প্রধানত নিম্নলিখিত পাঁচটি অংশ নিয়ে গঠিত:
1 ফ্লো চেম্বার এবং ফ্লুডিক্স সিস্টেম
2 লেজারের আলোর উৎস এবং মরীচি শেপিং সিস্টেম
3 অপটিক্যাল সিস্টেম
4 ইলেকট্রনিক্স, স্টোরেজ, ডিসপ্লে এবং অ্যানালাইসিস সিস্টেম
5 সেল বাছাই সিস্টেম
তাদের মধ্যে, লেজার আলোর উত্স এবং মরীচি গঠন পদ্ধতিতে লেজারের উত্তেজনা হল প্রবাহ সাইটোমেট্রিতে ফ্লুরোসেন্স সংকেতের প্রধান পরিমাপ। উত্তেজনা আলোর তীব্রতা এবং এক্সপোজার সময় ফ্লুরোসেন্স সংকেতের তীব্রতার সাথে সম্পর্কিত। লেজার হল একটি সুসংগত আলোর উৎস যা একক-তরঙ্গদৈর্ঘ্য, উচ্চ-তীব্রতা এবং উচ্চ-স্থায়িত্বের আলোকসজ্জা প্রদান করতে পারে। এই প্রয়োজনীয়তাগুলি পূরণ করার জন্য এটি আদর্শ উত্তেজনা আলোর উত্স।
লেজার উত্স এবং প্রবাহ চেম্বারের মধ্যে দুটি নলাকার লেন্স রয়েছে। এই লেন্সগুলি লেজারের উৎস থেকে একটি ছোট ক্রস-সেকশন (22 μm × 66 μm) সহ একটি উপবৃত্তাকার বিমে নির্গত একটি বৃত্তাকার ক্রস-সেকশন সহ একটি লেজার রশ্মিকে ফোকাস করে। এই উপবৃত্তাকার রশ্মির মধ্যে লেজার শক্তি একটি স্বাভাবিক বন্টন অনুযায়ী বিতরণ করা হয়, লেজার সনাক্তকরণ এলাকার মধ্য দিয়ে যাওয়া কোষগুলির জন্য ধারাবাহিক আলোকসজ্জার তীব্রতা নিশ্চিত করে। অন্যদিকে, অপটিক্যাল সিস্টেমে একাধিক সেট লেন্স, পিনহোল এবং ফিল্টার থাকে, যেগুলোকে মোটামুটিভাবে দুটি গ্রুপে ভাগ করা যায়: ফ্লো চেম্বারের আপস্ট্রিম এবং ডাউনস্ট্রিম।
ফ্লো চেম্বারের সামনের অপটিক্যাল সিস্টেমটি একটি লেন্স এবং পিনহোল নিয়ে গঠিত। লেন্স এবং পিনহোল (সাধারণত দুটি লেন্স এবং একটি পিনহোল) এর প্রধান কাজ হল লেজারের উৎস দ্বারা নির্গত একটি বৃত্তাকার ক্রস-সেকশন সহ লেজার রশ্মিকে একটি ছোট ক্রস-সেকশন সহ একটি উপবৃত্তাকার রশ্মিতে ফোকাস করা। এটি একটি স্বাভাবিক বন্টন অনুযায়ী লেজার শক্তি বিতরণ করে, লেজার সনাক্তকরণ এলাকা জুড়ে কোষগুলির জন্য ধারাবাহিক আলোকসজ্জার তীব্রতা নিশ্চিত করে এবং বিপথগামী আলো থেকে হস্তক্ষেপ কমিয়ে দেয়।
তিনটি প্রধান ধরনের ফিল্টার আছে:
1: লং পাস ফিল্টার (LPF) - শুধুমাত্র একটি নির্দিষ্ট মানের চেয়ে বেশি তরঙ্গদৈর্ঘ্যের আলোকে অতিক্রম করার অনুমতি দেয়।
2: শর্ট-পাস ফিল্টার (SPF) - শুধুমাত্র একটি নির্দিষ্ট মানের নীচে তরঙ্গদৈর্ঘ্যের আলোকে অতিক্রম করার অনুমতি দেয়।
3: ব্যান্ডপাস ফিল্টার (BPF) - শুধুমাত্র একটি নির্দিষ্ট তরঙ্গদৈর্ঘ্যের পরিসরে আলোকে অতিক্রম করতে দেয়।
ফিল্টারগুলির বিভিন্ন সংমিশ্রণ পৃথক ফটোমাল্টিপ্লায়ার টিউবগুলিতে (PMTs) বিভিন্ন তরঙ্গদৈর্ঘ্যে ফ্লুরোসেন্স সংকেতকে নির্দেশ করতে পারে। উদাহরণস্বরূপ, PMT এর সামনে সবুজ প্রতিপ্রভ (FITC) সনাক্ত করার জন্য ফিল্টার হল LPF550 এবং BPF525। PMT এর সামনে কমলা-লাল ফ্লুরোসেন্স (PE) সনাক্ত করতে ব্যবহৃত ফিল্টারগুলি হল LPF600 এবং BPF575। PMT এর সামনে রেড ফ্লুরোসেন্স (CY5) সনাক্ত করার জন্য ফিল্টার হল LPF650 এবং BPF675।
ফ্লো সাইটোমেট্রি মূলত কোষ সাজানোর জন্য ব্যবহৃত হয়। কম্পিউটার প্রযুক্তির অগ্রগতির সাথে, ইমিউনোলজির বিকাশ এবং মনোক্লোনাল অ্যান্টিবডি প্রযুক্তির উদ্ভাবনের সাথে, জীববিজ্ঞান, ওষুধ, ফার্মেসি এবং অন্যান্য ক্ষেত্রে এর প্রয়োগগুলি ক্রমবর্ধমানভাবে ব্যাপক হয়ে উঠছে। এই অ্যাপ্লিকেশনগুলির মধ্যে রয়েছে কোষের গতিবিদ্যা বিশ্লেষণ, কোষ অ্যাপোপটোসিস, কোষ টাইপিং, টিউমার নির্ণয়, ওষুধের কার্যকারিতা বিশ্লেষণ ইত্যাদি।
পোস্টের সময়: সেপ্টেম্বর-21-2023
